娃娃魚人工繁殖由于諸多難題未解決，至今尚未實現苗種的規模化生產，其資源就難以得到保護、增殖和利用。十幾年來，我們深入研究娃娃魚生殖生理學、發育生物學、繁殖生物學等多學科知識，發現了其制約因素：一是雄性性成熟率低(主要是指精液質量差);二是雌、雄性腺發育不同步;三是用肉眼很難準確判斷娃娃魚性成熟。針對這些發育生物學難題，我們將娃娃魚生殖生理學、繁殖生物學與現代生物技術、基因學、中醫學、中藥藥理學、中藥工程學、野生動物營養與飼料學等相關學科原理與技術進行整合，創新了娃娃魚人工繁殖技術。這一創新技術主要包括仿娃娃魚棲息環境、人工控溫、控光培育親體和投喂促進雌、雄性腺發育的中藥“生精散”及“促卵泡湯專用配合飼料”等技術。這一創新技術實現了娃娃魚苗種的規模化生產，為娃娃魚商品化養殖及保護、增殖與利用提供了技術平臺。本文將翔實介紹娃娃魚規模化繁殖技術。

1親體培育的生態環境

親體培育的生態環境條件是關系到娃娃魚的性腺發育是否成熟的重要因素。因而，建造與娃娃魚在自然界棲息環境的仿生態環境及人工控溫、控光、調節水質、投喂人工配合飼料是培育親體的重要技術。

1.1水溫

水溫是娃娃魚性腺發育的決定因素。水溫的主要作用是刺激娃娃魚下丘腦分泌釋放因子到垂體前葉，垂體產生2種激素(LH、FSH)，這2種激素均能對精子和卵子的發生進行調節。水溫還能促進親體攝食，從而滿足精卵細胞發育所需的營養物質。

水溫在每年3—9月份控制在16—24℃。水溫日變幅不要超過±1.5℃。

1.2光照

娃娃魚有背光運動的習性，即怕光照。因此，親體培育期間，光照要控制在300-5001x。也就是說，親體培育要在暗光環境條件下進行

1.3飼料

營養豐富的飼料是娃娃魚性腺發育的物質基礎。親體培育期間，飼料中要求蛋白質含量為42%—45.3%，糖為10%—18%，脂肪為2%—3%，多維和礦物質為1.5%，其它為7%—12%，中藥生精散和促卵泡湯2%—3%。飼料中蛋白質的氨基酸平衡極為重要，不容忽視。同時要依據親體性腺發育不同時相，投喂添加含量不同的中藥生精散和中藥促卵泡湯的配合飼料，這是親體培育的關鍵技術。

1.4水質調節

親體培育期間，要營造一個良好的水環境，這樣有利于親體健康生長發育。親體池水質要求礦化程度高，硬度大，透明。pH為6.5—7.5。山區可利用山泉水、溪流水培育親體，平原則應用井水(曝氣后)或自來水培育親體。水質調節主要是勤換水、勤清污、勤消毒。

2親體培育

2.1親體放養

娃娃魚親體放養主要有2種方式：一種是雌、雄混養;另一種是雌、雄單獨放養。

2.2親體培育

從我們20年來研究娃娃魚繁殖技術中發現：雌性娃娃魚性成熟率較高，懷卵量大;雄性娃娃魚性成熟率低，只有26.2%，而這26.2%的雄性精液質量也并非全部合格。人工隧道、地下室等人工工程培育的親體，雄性性成熟率較高，但雌性性成熟率反而較低。所以，娃娃魚至今未能實現苗種的規模化生產。因此，培育出大量性成熟的親體，是娃娃魚苗種規模化生產的關鍵技術。

娃娃魚性腺發育具有季節性周期的規律。每年3—4月份開始發育，7—10月份成熟。依據這一季節性周期規律，人工培育親體主要包括冬季培育、春季培育、產前培育及輔以生理學方法培育。

2.2.1冬季培育

冬季培育是指親體產后體虛階段。這一階段親體培育的主要目的是給娃娃魚親體補充大量營養物質，使其產后迅速恢復健康;其次是要加快精卵巢的退化與吸收，以便翌年精卵巢能正常發育。冬季培育主要工作是水溫調控和投餌。水溫調控分2個階段：首先是將水溫控制在18—23℃，使親體大量攝食、恢復健康，然后是將水溫降至10℃以下，使親體進入冬眠，加速精卵巢的吸收與退化。冬季餌料投喂是以配合飼料為主，并且要在配合飼料中添加2%的賴氨酸和1%的多種維生素。

2.2.2春季培育春季是親體性腺開始發育階段，這一階段親體性腺發育特征是第Ⅱ期向第Ⅲ期轉化的重要發育時期。此階段親體培育主要目的是促進親體性腺發育，使其性腺早日轉化到第Ⅲ期;其次則是投喂優質餌料，以滿足親體性腺發育所需營養物質。春季培育主要工作是調控水溫、投餌、調節光照和調節水質。調控水溫是指將水溫調控在18—22℃，使親體早開口攝食、性腺早開始發育;投餌則是投喂添加了促進娃娃魚性腺發育中藥的配合飼料。

2.3產前培育

此階段親體性腺發育特征是Ⅲ期末向V期初轉化時期，是親體性腺發育成熟的重要時期。因此，此階段親體培育的目的是培育出大量成熟的親體，主要采用生態學和生理學方法進行強化培育。

生態學方法：野生娃娃魚是在深山峽谷溪河有回流水和泉水的地方棲息的。因此，人工培育親體時，必須要建造1個仿生態環境(有回流水、冒泉水)的洞穴。同時將光照調節到5001x。水溫控制在親體所需最佳生長發育范圍18-23℃。

生理學方法：就是將促進親體性腺發育的中藥生精制劑注射到親體內，促進親體性腺發育成熟。娃娃魚體內聯結神經系統與性腺的腦垂體是生殖細胞發育成熟的重要器官。中藥生精注射液能促進娃娃魚垂體釋放激素，提高娃娃魚親體性成熟率。

3人工繁殖新技術

3.1親體選擇

親體性成熟特征：雄性泄殖孔隆起圈上小白點突出，內周邊紅腫可見。B超檢查：精巢長達7-9cm，寬為1-2cm;精巢飽滿，中間無溝表明成熟。

雌性腹部膨大、柔軟和富有彈性。B超檢查：可見卵徑6-7mm，卵巢呈單個鏈珠表明成熟。

3.2人工催產

3.2.1催產劑RES+LRH-A+DOM、LRH-A+HCG。

3.2.2催產劑量(按新標準)

雌性：RES+LRH-A+DOM4-10μg/kg;

HCG l00-1 5001U/kg

LRH-A 0.2-150μg/kg

雄性：上述劑量減半。

3.2.3催產方法親體催產注射部位均為背部肋間，進針0.3—0.5cm。針頭采用人用輸液軟塑料管針頭注射，這種針頭能防止注射親體時擺動。

3.2.4催產效應親體催產注射到產卵效應時間為4—11天，其中最佳產卵時間是4—6天。因此從催產后3天要有人值班，觀察雌性親體是否產有卵膠膜。

3.2.5人工授精娃娃魚人工授精采用干濕法，其操作步驟是：當發現雌性親體產出卵膠膜后，應立即用手輕托卵帶放人搪瓷盆中，另1人則將成熟好的雄性親體捉起來，放人布擔架內，用雙手輕擠雄魚腹部，見有乳白色精液時，則可將精液直接擠入卵帶上，輕晃卵帶盆，使卵受精均勻。15分鐘后加入純凈水。再過20分鐘后，將卵帶盆的水換2次。最后將卵帶放人小塑料籃中，懸浮于孵化池中，即進入孵化階段。

4人工孵化

4.1孵化的生態環境條件

4.1.1水溫和水源受精卵孵化水溫要求嚴格控制在20-22℃。水溫日變幅不要超過±1.0℃。水源可用自來水、泉水(泉水先要放人蓄水池，后放人孵化池)、井水(要曝氣后才使用)。泉水孵化易生水霉，因而用泉水孵化一定要提高泉水溫度。

4.1.2溶氧量放受精卵的水體的含氧量不低于5mg/L。

4.1.3光照受精卵光照要嚴格控制在300lx左右。

4.2人工孵化

受精卵主要用靜水孵化和微流水孵化。靜水孵化時，早晚要各換水1次。

孵化期間注意3點：一是控制好水溫和光照;二是防治水霉，即孵化時定期用水霉凈預防，濃度為0.5—0.8×10-6，浸泡受精卵10分鐘;三是防止胚胎“貼殼”，即定時輕翻動受精卵。