一 實驗目的

學會用質壁分離法測量植物細胞水勢。 二 器材與試劑

1 實驗儀器：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、移液管(10ml)，培養皿 2 實驗試劑：蔗糖溶液(1mol/L) 3 實驗材料：洋蔥 三 實驗原理

植物細胞是一個滲透系統，若將植物細胞放在各種不同濃度的蔗糖溶液中時，由于細胞液的濃度與外界溶液的濃度(或水勢)的差異。兩者便會發生水分的交換。當細胞液的濃度高于外溶液的濃度(或者說ψs cell<ψs sol即 ψw cell < ψw sol)時，細胞則吸水，使細胞處于緊張狀態;當細胞液的濃度低于外溶液的濃度時，(或者說ψs cell>ψs sol即ψw cell>ψw sol)時，細胞液中的水分則往外滲透，嚴重時則引起質壁分離;當細胞液的濃度與外界溶液的濃度相等時，(或者說 ψs cell= ψs sol 即ψw cell=ψw sol).細胞內外水分交換處于動態平衡。此時細胞既不緊張也不引起質壁分離，這時外溶液的濃度即為等滲濃度(即細胞內外ψs或ψw相等的濃度)。本實驗是以細胞的初始質壁分離(即一視野中有半數細胞產生初始質壁分離)確定為等滲濃度。根據公式，即可計算出外溶液的ψs ，即ψs= - CiRT[i:離解系數，蔗糖等于1;c:等滲濃度;R：氣體常數，0.0083 MPa·L/mol·K;T表示絕對溫度，即273+t(實驗時溶液的溫度)]。因為 ψs sol=ψw sol,又因為細胞初始質壁分離時，ψp cell=0,即 ψw cell= ψs cell,所以 ψw cell(或ψs cell)= ψw sol( 或ψs sol). 四 方法步驟

1.按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液(母液)分別配成0.1、0.2、0.3、0.5、0.6 mol/L蔗糖溶液各10ml。置于培養皿中，搖勻加蓋。

2.撕取帶有色素的植物組織(如花瓣、洋蔥鱗片等)表皮，分別投入各種濃度的蔗糖液中，(每濃度約放5片)，使其完全浸入。

3.20分鐘之后依次取出表皮放在載玻片上，滴上同樣濃度的溶液1滴，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察細胞產生質壁分離的情況，確定等滲濃度C。

4.測量液溫

5.根據公式ψs=-CiRT,計算出所測材料的ψw (ψs).

五 實驗報告

試比較洋蔥和大紅花花瓣水勢的高低。